Enzymatische Bioproduktion
Das Praktikum Enzymatische Bioproduktion vermittelt einen grundlegenden Einblick in die Produktion enzymatischer Biokatalysatoren, deren Aufreinigung sowie der wichtigsten Methoden zur Charakterisierung des produzierten Enzyms. Biokatalysatoren, vor allem in Form von Enzymen, sind essenziell für eine Vielzahl biotechnologischer, industrieller und pharmazeutischer Prozesse. Besonders bei Reaktionen, die Substrat- oder Produktbedingt unter milden Bedingungen ablaufen müssen, sind Biokatalysatoren den herkömmlichen chemischen Verfahren oft überlegen.
Im Praktikum wird die Carbonylreduktase 2 aus Candida parapsilosis durch heterologe Proteinexpression in Escherichia coli produziert und folgend mittels Affinitätschromatografie aufgereinigt. Analytische Methoden, die im Praktikum zur Bestimmung der Expressionsstärke und Aufreinigungseffizienz durchgeführt werden, sind horizontale denaturierende diskontinuierliche SDS Polyacrylamidgelelektrophorese und Proteinkonzentrationsbestimmung mittels BCA Assay. Neben diesen Methoden werden kontinuierlich Proben aus dem Arbeitsprozess auf ihre Kofaktor-abhängige enzymatische Aktivität überprüft. Nach erfolgreicher Aufreinigung des Enzyms erfolgt die Charakterisierung des Enzyms hinsichtlich des Substratspektrums, sowie die Bestimmung wichtiger kinetischer Kennzahlen des Enzyms nach der Michalis-Menten Kinetik. Im letzten Teil des Praktikums erfolgen in Anlehnung industrieller Prozesse Reaktionen im Satz-Reaktor sowie im kontinuierlich betriebenen Enzym-Membran Reaktor. Die Auswertung der Reaktionen erfolgt durch die Bestimmung der Substrat- und Produktkonzentrationen mittels Gaschromatographie.
Das Praktikum Enzymatische Bioproduktion wird im Wintersemester im Masterstudiengang der Biologie sowie im Sommersemester im Bachelorstudiengang Molekulare Biotechnologie als Wahlpflichtmodul angeboten. Die Prüfungsleistung gliedert sich in eine schriftliche Ausarbeitung in Form eines Protokolls, einen kurzen Vortrag über eine aktuelle, thematisch an das Praktikum angelehnte Publikation sowie ein mündliches Abtestat.
Vorbesprechung zum Praktikum
Zu dem Kurspraktikum "Enzymatische Bioproduktion" wird für alle Teilnehmer, die sich im selma eingeschrieben haben, eine Vorbesprechung stattfinden; Raum und Zeit werden noch bekanntgegeben!
Ansprechpartner: Dr. Christoph Loderer
E-Mail