CRISPR/Cas9 Facility

Leistungen im Überblick

Wir bieten ihnen den Service der Injektion ihres Konstruktes (Plasmid, BAC, CRISPR/Cas9) und die folgende Generierung ihrer Modelllinie. Das Facility- Equipment befähigt uns variabel mit ihren speziellen Wünschen umzugehen. Sie planen eine Injektion zur Generierung einer genetisch modifizierten Linie? Nehmen Sie mit uns Kontakt auf!

Rederivation

Zu unserem erweiterten Angebot gehört natürlich auch die Rederivierung kontaminierter oder parasitär befallener Linien. Sie möchten Importieren aber das Gesundheitszeugnis ist bedenklich? Dann wenden sie sich doch einfach an uns.

Kryokonservierung

Sie wollen Ihren Tierbestand reduzieren, aber ihre Linien nicht aufgeben? Eine sichere Lösung bietet die Kryokonservierung von Embryonen im Morula-Stadium oder von Spermien. Beide Verfahren werden in unserer Facility angeboten. Ihr Vorteil, die in Flüssigstickstoff gelagerten Linien befinden sich vor Ort und können jederzeit wieder etabliert werden.

Was ist CRISPR/Cas9?

Das CRISPR/Cas-System ist ein gentechnisches Instrument, das punktuelle Veränderungen der DNA (Genome Editing) ermöglicht. Der Ablauf des CRISPR/Cas- Systems erfolgt in drei Schritten:

Erkennung: Der CRISPR-Abschnitt erkennt mit Hilfe der darin integrierten RNA (Guide RNA) das jeweilige Ziel, eine bestimmte Sequenz in dem umzuschreibenden Gen.

Schnitt: Das an CRISPR gekoppelte Cas9-Protein schneidet den DNA-Doppelstrang genau an der gewünschten Zielsequenz.

Reparatur: Die zelleigenen Reparatursysteme fügen nun den durchtrennten DNA-Strang wieder zusammen. Je nachdem, wie das geschieht, können einzelne DNA-Bausteine entfernt oder modifiziert werden. Möglich ist auch, kurze DNA-Sequenzen neu einzubauen.

Das CRISPR/Cas-System leitet sich von einem Mechanismus ab, mit dem sich Bakterien wie bei einem Immunsystem vor schädlichen Viren schützen. Bei einer Infektion spalten die Cas-Proteine die DNA der eingedrungenen Viren in kleine Fragmente auf. Diese werden dann in den CRISPR-Abschnitt (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) eingefügt - Abschnitte im Bakterien-Erbgut, welche aus kurzen, sich wiederholenden DNA-Sequenzen (Repeats) bestehen. Bei einem erneuten Virenbefall werden diese CRISPR-Abschnitte in RNA umgeschrieben: Diese „prüft“ die Viren-DNA. Stimmt diese mit dem gespeicherten Abschnitt überein, wird sie durch die Cas-Proteine zerschnitten.

Dieses System („programmierbare Genschere“) funktioniert nicht nur in Bakterien, sondern grundsätzlich bei allen Organismen. Man kann damit jeden DNA-Strang an einer ganz bestimmten Stelle durchtrennen und im Zuge der anschließenden Reparatur einzelne DNA-Bausteine ausschneiden, austauschen oder auch neu einfügen. Dies läuft genau so ab wie bei einer natürlichen Mutation - mit dem Unterschied, dass diese zufällig stattfindet, während sie mit CRISPR/Cas und anderen Genome Editing-Verfahren gezielt herbeigeführt wird.

https://www.youtube.com/watch?v=PirXh_OfiS0

https://tu-dresden.de/med/der-bereich/news/crispr-cas9-technologie-zur-diagnose-von-krebsmutationen